PCR 内参 跑胶我跑半定量PCR的时候,内参出来的亮度不一致,有的 泳道很亮,有的暗一些,那我这张图还可以用吗,因为有人说内参的亮度应该保持一致?不是只要比目的基因和内参的灰度值来比较

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 23:41:49
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PCR 内参 跑胶
我跑半定量PCR的时候,内参出来的亮度不一致,有的 泳道很亮,有的暗一些,那我这张图还可以用吗,因为有人说内参的亮度应该保持一致?不是只要比目的基因和内参的灰度值来比较就可以的吗?

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如果按理论算的话,电泳条带亮度的不同代表起始浓度的不同,但是,你要知道,DNA模板浓度达到一定程度之后,PCR产物亮度和起始模板浓度并不是完全成正比的.
如10^7次方的模板和10^8次方的模板PCR的产物电泳亮度可能区别就不是很大,也就是扩增效率会随着模板浓度的变化而变化.
所以我们要尽量使内参的条带亮度一致,以保证模板浓度一致,这样就尽量可以使各个不同模板之间在扩增目的基因时的扩增效率一致.

PCR 内参 跑胶我跑半定量PCR的时候,内参出来的亮度不一致,有的 泳道很亮,有的暗一些,那我这张图还可以用吗,因为有人说内参的亮度应该保持一致?不是只要比目的基因和内参的灰度值来比较 RT PCR为何都要跑电泳,在PCR的时候为何要加内参?是为了判断是否是PCR过程中出现问题?内参跑不出来而cDNA能跑出来是怎么回事,相反又是怎么回事? 为什么我的RT-PCR内参跑不出来.目的条带到是跑出来了 请问我在做荧光定量pcr的时候内参的ct值很低大约在35左右,而目的基因ct值在25左右 还想再向您请教下 关于荧光定量PCR 相对定量内参基因的选择,如果我想用18SrRNA,我该怎么得到这个内参呢 半定量rt pcr内参和目的基因的引物加的量相同吗,能否放在同一管中跑PCR 实时定量pcr内参以及相对标准曲线的问题我最近在做pcr,不过身边没有熟练的人,很多基本问题搞不清楚,我用SYBR Green 进行实时定量pcr,看到网上说需要用内参,可是用内参的话,是不是需要用不 绝对定量PCR/荧光定量pcr 用途/半定量pcr/pcr荧光测定/pcr片段纯化 pcr产物 跑胶及数据处理 1.同一个样本的目的和内参可以在同一块胶的不同上样孔里跑,这样出来的条带可以做灰度比值分析吧,但是,如果我目的和内参 在两块不同的胶上 并且两块胶 拍照时候 求助水稻的actin 内参基因引物想用水稻的内参做荧光定量PCR,有哪位大侠有水稻内参Actin的引物么?在下感激不尽! 实时荧光定量PCR跑胶与普通PCR有区别吗?还是直接不用跑? 实时荧光定量pcr内参是什么东西怎么知道自己要买哪个内参 做荧光定量PCR和半定量PCR有什么区别?半定量的PCR退火温度和荧光定量PCR是一样的吗? 我准备做定量PCR,需要检测的基因大约有10个左右,请问我需要多少个内参基因?只用1个内参行不行?我们实验室经常用18S和β-actin两个内参,是不是内参越多越好?怎样去选择最合适的内参基因呢 RT-PCR是,内参是什么时候加入,作用是什么?谢谢 请问做半定量时,可以通过调节PCR后的浓度将内参基因的条带调成一致么? rp49基因是什么基因,很多做半定量PCR的用这个基因做内参,想了解下该基因是否是rRNA 荧光定量pcr引物设计原理在做荧光定量PCR预试验,先用普通pcr仪器跑的,模板是用CDNA.在设计引物的时候是不是必须俩个外显子跨过一个内含子?就是上下游引物必须落在俩个外显子上?我就按这