做荧光定量PCR,但是不知道内参的序列,如果NCBI上没有该怎么设计内参的引物呢?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/10 09:47:40
做荧光定量PCR,但是不知道内参的序列,如果NCBI上没有该怎么设计内参的引物呢?

做荧光定量PCR,但是不知道内参的序列,如果NCBI上没有该怎么设计内参的引物呢?
做荧光定量PCR,但是不知道内参的序列,如果NCBI上没有该怎么设计内参的引物呢?

做荧光定量PCR,但是不知道内参的序列,如果NCBI上没有该怎么设计内参的引物呢?
啥都没有的话是无法设计的
首先你可以克隆获得内参的序列,再进行下一步实验

你这什么物种啊,怎么可能NCBI上面会没有内参序列?个人不建议使用18sRNA做内参,这个含量太高了,你提RNA跑电泳看到的条带就是rRNA,定量估计几个cycle就起跳了那建议用什么基因呢?你找找这个物种或亲缘关系很近的物种的文献了,看看他们用的什么基因就用什么基因,实在没办法管家基因或者确定不受你实验影响的基因应该都行的...

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你这什么物种啊,怎么可能NCBI上面会没有内参序列?个人不建议使用18sRNA做内参,这个含量太高了,你提RNA跑电泳看到的条带就是rRNA,定量估计几个cycle就起跳了

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最简单的方法就是从别人文献中查,看看有没有学者已经在文献中公布内参序列了,实在找不到可以给文献作者发邮件询问、索要。你要是再自己克隆个内参基因的序列多费事呀!

做荧光定量PCR,但是不知道内参的序列,如果NCBI上没有该怎么设计内参的引物呢? 实时荧光定量pcr内参是什么东西怎么知道自己要买哪个内参 求助水稻的actin 内参基因引物想用水稻的内参做荧光定量PCR,有哪位大侠有水稻内参Actin的引物么?在下感激不尽! 我也想做荧光定量,但是我想比较两株乳酸乳球菌的乳酸脱氢酶基因的表达量的差异,不知道分别拿这两株的16S做内参行么? 第一次做荧光定量PCR,内参基因能够跑出来,而且溶解曲线也比较好,但是目的基因完全跑不出来目的基因的溶解曲线基本没有,模板浓度已经从10倍稀释,到倍稀释,到2倍稀释了.目的基因还是跑不 荧光定量PCR熔解曲线本人菜鸟,刚接触荧光定量PCR,有一个问题,不知道溶解曲线中为什么有那么多线,每条线是不是代表一个循环?如果是的话为什么同时扩增的两个基因,内参基因溶解曲线图上 请问我在做荧光定量pcr的时候内参的ct值很低大约在35左右,而目的基因ct值在25左右 还想再向您请教下 关于荧光定量PCR 相对定量内参基因的选择,如果我想用18SrRNA,我该怎么得到这个内参呢 实时荧光定量pcr数据如何统计?近日做实时荧光定量pcr,得到了不同的ct值,只是计算了△△ct以及2-△△ ct的值,但是我不知道如何使用spss进行统计分析,看到别人的文章都是均数±标准差的形式, 关于金银花荧光定量试验中的内参基因选择问题!求助,我要做一个关于金银花定量实验,不知道怎么选择内参基因,同学告诉我说要先筛选几个内参,内参基因可以直接去生物公司合成,不知道内 做荧光定量PCR和半定量PCR有什么区别?半定量的PCR退火温度和荧光定量PCR是一样的吗? 荧光定量PCR和实时荧光定量PCR的区别? 实时定量pcr内参以及相对标准曲线的问题我最近在做pcr,不过身边没有熟练的人,很多基本问题搞不清楚,我用SYBR Green 进行实时定量pcr,看到网上说需要用内参,可是用内参的话,是不是需要用不 请问荧光定量PCR进行相对定量时,若是目的基因和内参基因扩增效率不一致,为什么会导致结果的不准确?那么怎么平衡扩增效率呢? 荧光定量pcr标准曲线中的扩增效率太高怎么办做荧光定量标准曲线,同时做内参β-actin和自己的基因SA,结果内参相关系数为1.000,扩增效率为99.7%,SA相关系数为0.990,扩增效率为137.3%,初始模板浓度 猪GAPDH基因和β-actin基因的的序列或者是登入号我要做普通的PCR和反转录PCR,所以需要内参基因的序列设计引物,知道的请帮下忙 在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? 实时荧光定量PCR 的引物能不能用来做RT